Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 icon

Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871



НазваРаковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871
Дата конвертації15.08.2014
Розмір57.55 Kb.
ТипДокументи
джерело

Раковый эмбриональный антиген (CEA) набор для иммуноферментного анализа

Каталожный номер: EIA-1871

Иммуноферментный набор для количественного определения Ракового Эмбрионального Антигена (CEA) в сыворотке человека
Только для диагностики In Vitro

Хранить при 2-8C.
Показания к применению

Для количественного определения Ракового Эмбрионального Антигена (CEA) в сыворотке человека.
Вступление

Раково-эмбриональный антиген (CEA, РЭА) является гликопротеином на поверхности клетки и имеет массу 200 кДа. Впервые о нем было упомянуто в 1969 году, когда уровень РЭА в плазме был завышен у 35 из 36 пациентов с аденкарциномой толстой кишки, а после успешного хирургического вмешательства его титр снизился. Нормальные значения наблюдались у всех пациентов с другими формами рака или доброкачественных заболеваний. Последующие исследования не подтвердили первоначальных открытий. Сейчас ясно, что завышенный уровень РЭА обнаруживается при многих раках. РЭА звышен у более чем 30 % пациентов с раком легких, печени, поджелудочной железы, груди, толстой кишки, головы или шеи, мочевого пузыря, шейки матки и простаты. Завышенный уровень в плазме связан со стадией и масштабом заболевания, степенью дифференцированности рака и местоположением метастазов. РЭА также присутствует в нормальной ткани.
^ Принцип анализа

CEA ELISA основан на принципе твердофазного иммуносорбентного анализа с ферментной меткой. Система теста использует моноклональные антитела против определенной антигенной детерминанты на целой молекуле РЭА, которые служат для иммобилизации твердой фазы (на поверхности лунки). Козлиные антитела к РЭА, конъюгированные пероксидазой хрена (HRP) находятся в ферментном конъюгате. Образцу позволяют прореагировать одновременно с этими двумя антителами, в результате чего молекулы РЭА зажимаются между твердой фазой и связанными с ферментом антителами. После инкубации 1 час при комнатной температуре лунки промываются водой, чтобы удалить несвязанные меченые антитела. Добавляется Раствор TMB и инкубируется в течение 20 минут, До появления синего окрашивания. Развитие окрашивания останавливается добавлением Стоп-раствора, изменяющего окраску на желтый. Концентрация РЭА прямо пропорциональна цветной интенсивности образца. Абсорбция измеряется спектрофотометрически при 450 нм.
Реагенты

Материалы, входяие в состав набора:

· Микротитровальная панель на 96 лунок, покрытых антителами.

· Набор лиофилизироанных референс-стандартов РЭА: 0, 3, 12, 30, 60 и 120 нг/мл РЭА

· Ферментный конъюгат, 13 мл.

· TMB реагент (готов к использованию), 11 мл.

· Стоп-раствор (1N HCl), 11мл.

Необходимые материалы, не входящие в состав набора:

· Прецизионные пипетки: 50 мкл, 100 мкл и 1 мл.

· Съемные наконечники для пипеток.

· Дистиллированная вода.

· Вортексный миксер.

· Абсорбирующая бумага или бумажное полотенце.

· Графическая бумага.

· Ридер для микротитровальных панелей.
^ Забор и подготовка проб

Сыворотка приготовляется из цельного образца крови с помощью принятых в медицине методов. Данный набор предназначен только для работы с образцами без добавок.
^ Хранение набора

Невскрытые наборы должны храниться при 2-8°C, митротитровальная панель должна находиться в закрытом пакете с влагопоглотителем. Вскрытый набор стабилен до даты срока годности, указанной на упаковке, при условии хранения как описано выше.
Подготовка реагентов

  1. Все реагенты должны иметь комнатную температуру (18-25°C) перед началом анализа.

  2. Восстановить каждый лиофилизированный стандарт 1.0 мл дитсиллированной воды. Дать отстояться 20 минут и аккуратно перемешать. Восстановленные стандарты стабильны до 30 дней при хранении в закрытом виде при 2-8°C


Процедура анализа

  1. Закрепить необходимое количество лунок в держателе

  2. Раскапать 50 мкл стандартов, образцов и контролей в соответствующие лунки.

  3. Раскапать 100 мкл ферментного конъюгата в каждую лунку.

  4. Тщательно перемешивать 30 секунд. Важно добиться полного смешивания на этом этапе.

  5. Инкубировать при комнатной температуре (18-25°C) 60 минут.

  6. Удалить инкубационную смесь в контейнер для отходов.

  7. Промыть лунки 5 раз дистиллированной или деионизированной водой. Не использовать водопроводную воду!

  8. Резко постучать панелью по абсорбирующей бумаге, чтобы удалить оставшиеся капли.

  9. Раскапать 100мкл TMB Реагента в каждую лунку. Аккуратно перемеивать в течение 5 секунд.

  10. Инкубировать при комнатной температуре 20 минут.

  11. Остановить реакцию, добавив 100мкл Стоп-раствора в каждую лунку.

  12. Аккуратно перемешивать 30 снкунд. Важно, чтобы синий цвет полностью сменился на желтый.

  13. Считать оптическую плотность при 450нм в течение 15 минут.


Подсчет результатов

  1. Подсчитать средние величины абсорбции (A450) для каждого набора стандартов, контролей и образцов.

  2. Построить стандартную кривую, поместив значения абсорбциидля каждого референс-стандарта против соответствующей концентрации в ng/ml на графической бумаге, с абсорбцией по вертикальной оси (y) и концентрацией по горизонтальной (x).

  3. Используя среднее значение абсорбции для каждого образца, определить соответствующую концентрацию CEA в нг/мл по стандартной кривой.


^ Пример стандартной кривой

Данная стандартная кривая приведена только для иллюстрации и не может использоваться для вычисления неизвестных.


РЭА (нг/мл)

Абсорбция (450нм)

0

0.019

3

0.105

12

0.362

30

0.814

60

1.390

120

2.032


Ожидаемые результаты и чувствительность

В самом полном исследовании СЕА тестировались 35,000 образцов, взятых у 10,000 пациентов, и контролей. Из 1425 здоровых некурящих людей, у 98.7% значения были ниже 5.0 нг/мл. Каждой лаборатории рекомендуется установить свои нормальные уровни. Минимальная определяемая концентрация СЕА для данного теста - 1.0нг/мл.

Ограничения процедуры

  1. Надежные результаты могут быть получены только при полном понимании инструкции к набору и следовании опыту лабораторной практики.

  2. Процедура промывки является критической. Недостаточная промывка может повлиять на точность результатов.


Литература

См. оригинал инструкции на английском языке




Схожі:

Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconDrg®  2  микроглобулин каталожный номер: eia -1789
Во избежание искажения результатов анализа настоятельно рекомендуется сверять данный перевод с инструкцией, вложенной в набор, уделяя...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconIn vitro Вступление Набор для иммуноферментного анализа drg
Набор для иммуноферментного анализа drg® hpl позволяет определить количество Плацентарного Лактогена (ПЛ) человека в сыворотке
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconТрийодтиронин (T3) набор для иммуноферментного анализа Номер по каталогу: eia -1780
Щитовидная железа оказывает мощнейшее регуляторное влияние на рост, дифференциацию, клеточный метаболизм и гормональный баланс, а...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconТироксин (T4) набор для иммуноферментного анализа Номер по каталогу: eia -1781
Повышение уровня обнаружено при гипертиреозе из-за Базедовой болезни и из-за болезни Пламмера, а также при остром и подостром тириоидите....
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconDrg® Helicobacter pylori IgM (eia-2111) Пересмотрено 1 0 2006
Набор для иммуноферментного анализа для качественного определения антител класса IgM к Helicobacter pylori
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconИнструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения
Набор реагентов «ифа-пролактин-01» предназначен для количественного определения пролактина в сыворотке крови человека методом твердофазного...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconТолько для диагностики ин-витро! Принцип анализа drg novum adenovirus igm elisa
Набор иммуноферментного анализа для качественного и полуколичественного определения антител класса IgM к Аденовирусу в сыворотке...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconИнструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения
Набор реагентов «Гонадотропинифа-лг» предназначен для количественного определения концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) в сыворотке...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconИнструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения
Набор реагентов «Стероидифа-тестостерон-01» предназначен для количественного определения концентрации тестостерона в сыворотке крови...
Раковый эмбриональный антиген (cea) набор для иммуноферментного анализа Каталожный номер: eia -1871 iconИнструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения
Набор реагентов «Тироидифа-трийодтиронин-01» предназначен для количественного определения концентрации трийодтиронина в сыворотке...
Додайте кнопку на своєму сайті:
Документи


База даних захищена авторським правом ©zno.znaimo.com.ua 2000-2014
При копіюванні матеріалу обов'язкове зазначення активного посилання відкритою для індексації.
звернутися до адміністрації
Документи